Protein/ja: Difference between revisions

Protein/ja
Created page with "タンパク質の''生体内''研究は、多くの場合、細胞内でのタンパク質の合成と局在に関係している。多くの細胞内タンパク質は細胞質で合成され、膜結合タンパク質や分泌タンパク質は小胞体で合成されるが、タンパク質がどのようにして特定の小器官や細胞構造に標的化されるかの詳細は不明なこと..."
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タンパク質の''生体内''研究は、多くの場合、細胞内でのタンパク質の合成と局在に関係している。多くの細胞内タンパク質は[[cytoplasm/ja|細胞質]]で合成され、膜結合タンパク質や分泌タンパク質は[[endoplasmic reticulum/ja|小胞体]]で合成されるが、タンパク質がどのようにして特定の小器官や細胞構造に[[protein targeting/ja|標的化]]されるかの詳細は不明なことが多い。細胞局在を評価するための有用な技術は、遺伝子工学を用いて、目的の天然タンパク質と[[green fluorescent protein/ja|緑色蛍光タンパク質]](GFP)のような"[[reporter gene/ja|レポーター]]"とが結合した[[fusion protein/ja|融合タンパク質]]あるいは[[chimera (protein)/ja|キメラ]]を細胞内で発現させることである。融合タンパク質の細胞内での位置は、反対側の図に示すように、[[:en:microscopy|顕微鏡]]を使ってきれいかつ効率的に可視化することができる。
タンパク質の''生体内''研究は、多くの場合、細胞内でのタンパク質の合成と局在に関係している。多くの細胞内タンパク質は[[cytoplasm/ja|細胞質]]で合成され、膜結合タンパク質や分泌タンパク質は[[endoplasmic reticulum/ja|小胞体]]で合成されるが、タンパク質がどのようにして特定の小器官や細胞構造に[[protein targeting/ja|標的化]]されるかの詳細は不明なことが多い。細胞局在を評価するための有用な技術は、遺伝子工学を用いて、目的の天然タンパク質と[[green fluorescent protein/ja|緑色蛍光タンパク質]](GFP)のような"[[reporter gene/ja|レポーター]]"とが結合した[[fusion protein/ja|融合タンパク質]]あるいは[[chimera (protein)/ja|キメラ]]を細胞内で発現させることである。融合タンパク質の細胞内での位置は、反対側の図に示すように、[[:en:microscopy|顕微鏡]]を使ってきれいかつ効率的に可視化することができる。


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タンパク質の細胞内局在を解明する他の方法では、小胞体、ゴルジ体、リソソームや液胞、ミトコンドリア、葉緑体、細胞膜などの領域について、既知のコンパートメントマーカーを使用する必要がある。これらのマーカーに蛍光タグを付けたものや、既知のマーカーに対する抗体を用いることで、目的のタンパク質の局在を同定することがより簡単になる。例えば、[[indirect immunofluorescence/ja|間接免疫蛍光法]]を用いれば、蛍光の共局在化と局在の証明が可能になる。蛍光色素は、同様の目的で細胞区画を標識するために用いられる。
Other methods for elucidating the cellular location of proteins requires the use of known compartmental markers for regions such as the ER, the Golgi, lysosomes or vacuoles, mitochondria, chloroplasts, plasma membrane, etc. With the use of fluorescently tagged versions of these markers or of antibodies to known markers, it becomes much simpler to identify the localization of a protein of interest. For example, [[indirect immunofluorescence]] will allow for fluorescence colocalization and demonstration of location. Fluorescent dyes are used to label cellular compartments for a similar purpose.
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