リボフラビンは1920年に発見され、1933年に単離され、1935年に初めて合成された。精製された固体の状態では、水溶性の黄橙色の結晶性の粉末である。ビタミンとしての機能に加えて、食品着色料として使用される。生合成は細菌、菌類、植物で行われるが、動物では行われない。リボフラビンの工業的合成は当初化学的プロセスで達成されたが、現在の商業的製造は菌類の菌株や遺伝子組み換え細菌を用いた発酵法に依存している。