Translations:Biotin/29/ja

バイオテクノロジーにおける利用

ビオチンの化学修飾バージョンは、生化学的アッセイのためにタンパク質や非タンパク質化合物を単離するためにバイオテクノロジー産業全体で広く使用されている。卵由来のアビジンはビオチンと解離定数K_d≈10^-15 Mで強く結合するため、この非常に安定な相互作用を利用することで、目的のビオチン化化合物をサンプルから単離することができる。まず、化学修飾されたビオチン試薬は、ビオチン化と呼ばれるプロセスを経て、溶液中の標的化合物と結合する。どの化学修飾を使用するかの選択により、ビオチン試薬が特定のタンパク質に結合する。次に、サンプルはビーズに結合したアビジンとインキュベートされ、次にすすぎ、結合していないタンパク質をすべて除去し、アビジンに結合したビオチン化タンパク質だけを残す。最後に、過剰の遊離ビオチンでビーズからビオチン化タンパク質を溶出する。このプロセスは、ビーズに結合した細菌由来のストレプトアビジンを利用することもできるが、アビジンよりも解離定数が高いため、ビーズからビオチン化タンパク質を溶出するには非常に過酷な条件が必要となり、目的のタンパク質が変性してしまうことが多い。