葉酸の形態の葉酸は、葉酸欠乏症によって引き起こされる貧血の治療に用いられる。葉酸はまた、胎児の神経管欠損症（NTDs）のリスクを減らすために、妊娠中の女性がサプリメントとして使用する。妊娠初期の低レベルが、NTDを持つ赤ちゃんの半数以上の原因であると考えられている。80カ国以上が、NTDの発生率を低下させるための対策として、特定の食品に葉酸を義務的または自主的に強化している。比較的多量の葉酸を長期的に補給すると、脳卒中のリスクがわずかに低下し、前立腺がんのリスクが上昇する。大量の葉酸補給は、ビタミンB12欠乏症を隠してしまう懸念がある。